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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·13年
97014ESHuman DKK-1 ELISA Kit
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 97014ES 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：269更新時(shí)間：2025-02-07 13:53:14
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 兩周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,制藥/生物制藥 |
|---|
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Dickkopf相關(guān)蛋白1（DKK-1）屬于Dickkopf家族的成員。其成員大多具有抑制Wnt信號(hào)通路，在脊椎動(dòng)物發(fā)育過程起重要作用，也與骨形成，腫瘤和阿爾茲海默癥有關(guān)。DKK-1是一種分泌蛋白，其與Wnt受體LRP5/6及另一類穿膜蛋白Kremen1/2結(jié)合，形成三聚體，誘導(dǎo)快速的細(xì)胞內(nèi)吞，減少細(xì)胞膜上的LRP5/6，由此阻斷了Wnt信號(hào)向胞內(nèi)的傳遞。DKK1的表達(dá)水平與骨髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）的浸潤水平正相關(guān)，同時(shí)其與骨病，風(fēng)濕病等的關(guān)聯(lián)，使其稱為臨床研究的重要靶點(diǎn)。
翌圣Human DKK-1 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用于定量測(cè)定血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的DKK-1。特異性抗DKK-1抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的DKK-1與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中DKK-1的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 97014ES48 / 97014ES96 |
規(guī)格 | 48 T / 96 T |
檢測(cè)范圍 | 31.25-2000 pg/mL |
檢測(cè)方法 | 雙抗夾心法 |
檢測(cè)時(shí)長 | 4.5小時(shí) |
靈敏度 | 19.2 pg/mL |
稀釋線性 | 77 - 121% |
回收率 | 77 - 122% |
板內(nèi)差 | 5.1% |
板間差 | 6.7% |
標(biāo)曲制定
計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品和樣本復(fù)孔的平均OD值，并減去空白孔的平均OD值作為校準(zhǔn)OD值。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，校準(zhǔn)OD值的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。多種繪圖和統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件可以用于輔助繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行未知樣本濃度的計(jì)算。四參數(shù)擬合法往往擬合效果較好，其它方法如線性擬合也可能獲得較好擬合結(jié)果，需要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
靈敏度檢測(cè)
DKK-1的檢測(cè)限為19.2 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
精密度檢測(cè)
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定6次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)30次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。
項(xiàng)目 | 板內(nèi)精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
6 | 6 | 6 | 22 | 22 | 22 | |
平均值 | 968.56 | 247.11 | 71.97 | 988.44 | 261.31 | 68.73 |
標(biāo)準(zhǔn)差 | 32.00 | 12.95 | 4.83 | 48.74 | 22.34 | 4.70 |
變異系數(shù)（%） | 3.3 | 5.2 | 6.7 | 4.9 | 8.5 | 6.8 |
回收率檢測(cè)
通過不同水平的DKK-1添加于樣本中來測(cè)定回收率，其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍（%） |
血清 | 89.3 | 81.7-101.5 |
血漿 | 82.9 | 77.3-87.7 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清 | 101.7 | 77.8-122.1 |
稀釋線性檢測(cè)
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 86.6 | 79.3-92.5 |
1:04 | 89.5 | 80.2-98.2 |
1:08 | 88.7 | 79.9-96.5 |
1:16 | 92.9 | 84.5-102.4 |
血漿稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 89.3 | 83.5-97.0 |
1:04 | 93.4 | 81.6-99.9 |
1:08 | 104.6 | 83.4-121.2 |
1:16 | 101.8 | 77.2-114.6 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 99.0 | 81.4-112.2 |
1:04 | 100.4 | 86.0-111.8 |
1:08 | 103.3 | 83.5-118.4 |
1:16 | 100.1 | 79.6-112.9 |
樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測(cè)若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 | 樣本數(shù)目 | 平均值（pg/mL） | 樣本值（pg/mL） |
血清 | 10 | n.d. | n.d. |
血漿 | 8 | 569.8 | 391.5-1059.8 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清 | 4 | 365.5 | 168.4-414.3 |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)得15.63 pg/mL
測(cè)定特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組DKK-1，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
Recombinant human: |
Cerberus |
Dkk-2 |
Dkk-3 |
Dkk-4 |
Kremen-1 |
Kremen-2 |
Soggy-1 |
檢測(cè)簡(jiǎn)圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標(biāo)曲不好 | 移液量不準(zhǔn)確 | 檢查移液器，按時(shí)校準(zhǔn)，仔細(xì)操作，充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當(dāng) | ||
顯色值偏低 | 孵育時(shí)間太短 | 給予足夠的孵育時(shí)間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當(dāng) | 校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 | |
CV偏高 | 酶標(biāo)板清洗不當(dāng) | 使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機(jī)，檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準(zhǔn)備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲(chǔ)存不當(dāng) | 按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |
