U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞介紹：

種屬：人；貼壁生長；生長周期：3~4天

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞生長：貼壁

U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：

【瘤細(xì)胞懸液接種】

1）無菌選取生長良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；

2）在PBS中將瘤組織碎后用勻漿器研磨，經(jīng)80～100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；

3）培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；

4）計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107～108/ml；

5）常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位，＞106細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；

6）次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。

【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下：

1）將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)；

2）消毒動物，左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞；

3）接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用9號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml；

4）抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>