供貨周期 |
兩周 |
規(guī)格 |
1個(gè)T25瓶 |
貨號(hào) |
YADS-C-0076 |
人肝癌細(xì)胞;HepG2
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一15歲男性白人的肝細(xì)胞癌組織。模式染色體數(shù)為55條,有一條重排的1號(hào)染色體。此細(xì)胞對(duì)裸鼠沒(méi)有致瘤性。未檢測(cè)到HBV的基因組。
人肝癌細(xì)胞;HepG2
人肝癌細(xì)胞;HepG2
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一15歲男性白人的肝細(xì)胞癌組織。模式染色體數(shù)為55條,有一條重排的1號(hào)染色體。此細(xì)胞對(duì)裸鼠沒(méi)有致瘤性。未檢測(cè)到HBV的基因組。
培養(yǎng)條件 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR Amelogenin:XY;CSF1PO:10,11;D13S317:9,13;D16S539:,13;D18S51:13,14;D19S433:15.2;D21S11:29,31;D2S1338:19,20;D3S1358:15,16;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:15,16;FGA:22,25;TH01:9;THOX:8,9;vWA:17;
同工酶 無(wú)
染色體 50-64
細(xì)胞特性:1)】人肝癌細(xì)胞;HepG2圖片組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌yi酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入wan全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。