目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 病毒DNA純化試劑盒(沉淀法)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
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貨號 | XY-D-1693 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Viral DNA Purification Kit |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品是專門用于從血清、血漿、腦脊液等液體樣品中提取病毒 DNA 的產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
1.回收率高,可以達(dá)到 90%以上,高于絕大部分基于離心柱的提取方法。
2.靈敏度高,通過 PCR 檢測到的最終靈敏度可以達(dá)到 30-50 拷貝/mL。
3.一管式操作,不使用離心柱,整個操作過程均在室溫下完成。
4.安全無毒,不需要使用苯-酚和氯仿等有機(jī)溶液。
5.可以處理各種液體樣品,包括血清、血漿、尿液、腦脊液、唾液、眼淚、培養(yǎng) 基等,還可以處理拭子,糞便,實體組織等(但需要前處理)。
6.處理量大,如果加上病毒離心富集步驟,最多可以處理 1.5 mL 液體病毒樣品。
7.與 PCR、熒光 PCR、LAMP 等后續(xù)擴(kuò)增技術(shù)兼容。
8.本產(chǎn)品足夠 50 次微量提取,每次微量提取可以處理 0.2 mL(不需要離心濃縮)或 1.5 mL 的樣品(需要離心濃縮)。
9.病毒DNA純化試劑盒(沉淀法)只能用于科研,不能用于臨床。
產(chǎn)品參數(shù):
成份規(guī)格包裝
DNA 病毒裂解液30 mL30 mL 本色瓶
使用手冊1 份1 份
保存和運輸
常溫運輸和保存、有效期一年。
自備試劑
異丙醇,75%乙醇
使用方法:
1. 在 1.5 mL 螺旋蓋塑料離心管(不要使用壓蓋式塑料離心管)中加入 0.2 mL 液體樣品(血清、血漿、尿液、腦脊液、唾液、眼淚等等)。
a)如果是口腔拭子、咽喉拭子等各種拭子樣品,則將拭子放入 0.2 mL 自備生理鹽水中擠壓出液體,然后取 0.2 mL 進(jìn)行 DNA 提取。
b)如果是糞便等半固定樣品,則取約 0.3 mL 的樣品,加入 0.3 mL 自備生理鹽水,震蕩重懸,離心取 0.2 mL 上清進(jìn)行 DNA 提取。
c)如果血液,細(xì)胞培養(yǎng)液等含細(xì)胞的液體,可以離心用上清,也可以直接取用, 但后者提取的 DNA 中有細(xì)胞的基因組 DNA。
d)如果樣品是實體組織或培養(yǎng)細(xì)胞,則需要在自備生理鹽水中勻漿后離心,用
0.2 mL 上清液(含病毒)進(jìn)行 DNA 提取,但此種情況下最后得到的 DNA 不可避免的會含有基因組 DNA。
e) 如果液體樣品中的病毒需要富集,可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液體在
4℃ 24,000×g 冷凍離心 60 分鐘,移棄 1.3 mL、用剩下的 0.2 mL 繼續(xù)操作。
2.在 0.2 mL 樣品中加入 0.6 mL DNA 病毒裂解液,振蕩 30 秒混勻后室溫放置10 分鐘。
3.振蕩 30 秒混勻后加入 0.7 mL 自備的異丙醇,振蕩 30 秒混勻后,15,000× g 室溫離心 15 分鐘。
4.移棄上清,注意不要觸及管底的 DNA 沉淀,加入 1.0 mL 75%乙醇,振蕩數(shù)秒后 15,000×g 室溫離心 5 分鐘。
5.移棄上清,注意不要觸及管底的 DNA 沉淀。再短暫離心數(shù)秒,移棄殘留液體
(殘留的乙醇會影響后續(xù)反應(yīng))。
6.如果此時離心面的管壁上有可見的膜狀沉淀,屬于正?,F(xiàn)象(常見于血清血漿樣品)。加入 20 μL 自備的 TE 緩沖液,用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀,使其溶解。溶解液混濁或有少量不溶物是正?,F(xiàn)象。不要離心只取上清使用,因為不溶沉淀物中含有 DNA,必須取混合液使用(哪怕很渾濁)。
7.樣品可以直接取適量用于 PCR,也可保存于-20℃長期保存。
選擇我們的病毒DNA純化試劑盒(沉淀法),就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護(hù)航!
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