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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本產(chǎn)品是專門(mén)用于從各種土壤樣品和河海沉積物中提取高質(zhì)量的DNA 的試劑。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.去污染效果好，得到的 DNA 可以直接作為PCR 模板或酶切，不需要再進(jìn)行去腐殖酸處理。

2.操作過(guò)程簡(jiǎn)單快速，整個(gè)操作只需要 10 多分鐘，擴(kuò)容性好。

3.產(chǎn)量高，每克土壤一般可以提取到 5-50 µg DNA，片段長(zhǎng)度在 20-50 Kb， OD260/280 一般都在 1.8 以上。

4.適合于各種土壤（包括河海沉積物）。

5.土壤 DNA 純化試劑盒（過(guò)柱法）足夠 50 次土壤 DNA 微量提取。

產(chǎn)品參數(shù)：

成份規(guī)格包裝

土壤 DNA 純化溶液A25 mL30 mL 本色瓶

土壤 DNA 純化溶液 B25 mL30 mL 本色瓶

專用上柱液40 mL60 mL 本色瓶

離心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶

DNA 洗脫液（基因組純化專用）10 mL10 mL 本色瓶

使用手冊(cè)1 份無(wú)

運(yùn)輸及保存

常溫運(yùn)輸及保存，保存期為一年。

自備試劑

氯仿。

使用方法：

1.65℃預(yù)熱土壤 DNA 純化溶液 A，待其沉淀溶化后充分顛倒混勻。取 0.5 mL

加入到 1.5 mL 塑料離心管中并放置于 65℃待用。

2.稱取 0.1-0.3 g 的土壤，加入到裝有預(yù)熱的土壤 DNA 純化溶液 A 的離心管中。

3.震蕩器上劇烈震蕩 5-10 分鐘。如果是擴(kuò)量操作，可以使用更多土壤和較大離心管。也可以將同一種土壤在較大離心管中震蕩處理，然后再分到 1.5 mL 離心管中。注意:不論使用大的還是小的離心管，一定要讓管底的土壤震蕩起來(lái)。

4.將離心管置于 65℃水浴中保溫至少 5 分鐘。

5.14000 g 室溫離心 3 分鐘，將上清轉(zhuǎn)移到一新離心管中(上清液一般呈淡黃色或深棕色，實(shí)際顏色取決于腐殖酸的含量，上清液的體積一般為 300-400 µL)。

6.在上清液中加入等體積的土壤 DNA 純化溶液 B，上下顛倒 30 秒充分混勻，溶液將呈白色或淡黃色混濁狀。

7.將離心管冰浴至少 5 分鐘。

8.14000 g 室溫離心 3 分鐘，轉(zhuǎn)移上清到新的 1.5 mL 離心管中，上清液顏色將比第 4 步得到的上清的顏色稍淡，體積在 0.7 mL 左右。

注意：下面第 8-第 9 步的氯仿抽提操作可以省略，直接進(jìn)入第 10 步，但 DNA 的

產(chǎn)量會(huì)低 50%左右，OD260/280 在 1.7-1.8。如果省略第 8-9 步直接進(jìn)入第 10

步，則轉(zhuǎn)移的溶液體積不要超過(guò) 0.6 mL，否則沒(méi)有空間加專用上柱液。

9.加入 0.2 mL 的氯仿(自備)，震蕩器上充分振蕩 30 秒混勻。注意:一定要讓管底的溶液震蕩起來(lái)。

10.14000 g 室溫離心 3 分鐘，小心轉(zhuǎn)移上清到新離心管中。說(shuō)明：離心后兩相交界面將有白色膜狀物，其中有機(jī)相部分顏色較深，一般呈淡棕色。上清的顏色取決于土壤中腐殖酸的含量。將上清轉(zhuǎn)移到新的 1.5 mL 離心管時(shí)，不要超過(guò)

0.6 mL，否則沒(méi)有空間加專用上柱液。如果有多余的可以棄之不用。

11.加入 1.5 倍體積的專用上柱液，上下顛倒 30 秒混勻。

12.分兩次上柱（即先轉(zhuǎn)移一半的混合液到離心吸附柱中，14000 g 室溫離心半分鐘，棄穿透液，然后再將剩下的混合液到離心吸附柱中，14000 g 室溫離心半分鐘，棄穿透液）。

13.加 0.7 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，14000 g 室溫離心半分鐘，棄穿透液。

14.再加 0.3 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，14000 g 室溫離心半分鐘，棄穿透液。增加一步洗滌能使最后得到的 DNA 的純度稍有提高。

15.14000 g 室溫再離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的通用洗柱液會(huì)污染

DNA。

16.將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一新的 1.5 mL 塑料離心管中，加入 50 uL DNA 洗脫液

（基因組純化專用）。

17.室溫放置離心吸附柱 1-2 分鐘。

18.14000 g 室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為提取到的 DNA 樣品，可以立即使用或存放于冰箱待用。

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