精品国产亚洲国产亚洲,久热中文在线观看精品视频,成人三级av黄色按摩,亚洲AV无码乱码国产麻豆

您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)

| 注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

18701994219

products

目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 一管式點(diǎn)突變?cè)噭┖?/p>

一管式點(diǎn)突變?cè)噭┖?/div>
  • 一管式點(diǎn)突變?cè)噭┖? data-zoom-image=
參考價(jià) ￥ 600
訂貨量 ≥1盒
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
￥600
≥1盒
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 烜雅生物
  • 型號(hào)
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

$NV_PropertyInfoName.SubString(0,25)

>
在線詢價(jià) 收藏產(chǎn)品 評(píng)價(jià)

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10次
貨號(hào) XY-D-1869 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 英文名稱 One-Tube Point Mutagenesis Kit
保存條件 -20℃ 有效期 1年
一管式點(diǎn)突變?cè)噭┖心０彘L(zhǎng)度為10-15 Kb的DNA（包括質(zhì)粒的長(zhǎng)度）。由于起始模板DNA很少，得到的擴(kuò)增產(chǎn)物幾乎都是突變DNA，故突變效率高達(dá)90%。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

基因的定點(diǎn)突變是重要的分子生物學(xué)技術(shù)，廣泛用于載體構(gòu)建、基因改造、蛋白質(zhì)功能研究等領(lǐng)域。本產(chǎn)品就是專門用于從含有野生型DNA插入片段的質(zhì)粒DNA快速制備突變（包括點(diǎn)突變、插入突變和缺失突變）的試劑盒。


一管式點(diǎn)突變?cè)噭┖?/><strong></strong></p><p><strong>產(chǎn)品特點(diǎn)：</strong></p><p>1.直接使用甲基化的質(zhì)粒DNA作為模板，故模板必須是從dam+基因型的大腸桿菌宿主菌中制備的，常見(jiàn)的dam+菌株是DH5?。某個(gè)菌株是不是 dam+需要詢問(wèn)菌株供用廠家。</p><p>2.有管式操作，整個(gè)過(guò)程只需要2小時(shí)。</p><p>3.模板DNA的需求量很少，只需要2 ng。</p><p>4.模板長(zhǎng)度為10-15 Kb的DNA（包括質(zhì)粒的長(zhǎng)度）。由于起始模板DNA很少，得到的擴(kuò)增產(chǎn)物幾乎都是突變DNA，故突變效率高達(dá)90%。</p><p>5.實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR擴(kuò)增，不需要電泳檢測(cè)，節(jié)約寶貴的樣本材料。</p><p>6.最終產(chǎn)物可以直接用于化學(xué)轉(zhuǎn)化或電轉(zhuǎn)化。</p><p>7.基于PCR擴(kuò)增，對(duì)模板DNA序列沒(méi)特殊要求，可以用于突變?nèi)魏蜠NA位點(diǎn)。</p><p>8.使用超保真酶，PCR過(guò)程中不會(huì)引入突變。</p><p>9.不但可以制備點(diǎn)突變，還可以制備1-3個(gè)堿基的缺失突變和插入突變。</p><p>10.本產(chǎn)品足夠10 次點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)。</p><p>11.一管式點(diǎn)突變?cè)噭┖兄荒苡糜诳蒲小?/p><p><br/></p><p><strong>產(chǎn)品參數(shù)：</strong></p><p>成份 規(guī)格包裝</p><p>染料法 2×超保真PCR MasterMix100 ?L0.5 mL 本蓋管</p><p>DpnI 限制性內(nèi)切酶，10 U/?L20 ?L0.5 mL 紅蓋管</p><p>超純水 1 mL1.5 mL 藍(lán)蓋管</p><p>使用手冊(cè) 1 份無(wú)</p><p>運(yùn)輸及保存</p><p>低溫運(yùn)輸、-20℃保存，有效期一年。</p><p>自備試劑</p><p>質(zhì)粒 DNA、突變引物、細(xì)菌轉(zhuǎn)化試劑。</p><p><br/></p><p><strong>使用方法：</strong></p><p>一、引物設(shè)計(jì)</p><p>1.需根據(jù)突變位點(diǎn)周邊序列設(shè)計(jì)兩條錯(cuò)位互補(bǔ)引物，引物的 Tm 應(yīng)該在 72℃左右，突變位點(diǎn)（可以是 1 個(gè)堿基，也可以是數(shù)個(gè)堿基）左右各有 14 個(gè)完-全互補(bǔ)的堿基對(duì)， 上引物和下引物的 3’端各多出 6 個(gè)堿基。下面為一個(gè)虛擬序列的兩條錯(cuò)位互補(bǔ)引物，XXX 表示三個(gè)野生型堿基。NNN 表示希望突變后得到的堿基。陰影部分的序列</p><p>跟其互補(bǔ)鏈?zhǔn)峭?全互補(bǔ)。</p><p>GCGATACGCAACTANNNGATCTCCATGCAGCTCATGC-3' 3'-TGCGACCGCTATGCGTTGATXXXCTAGAGGTACGTCG</p><p>2.引物的 GC 含量在 40％-60％之間，不能在 PCR 時(shí)形成引物二聚體。</p><p>3.引物必須 HPLC 純化。</p><p>4.本方法是以質(zhì)粒 DNA 為模板進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，因此質(zhì)粒 DNA 完整性非常重要。如果質(zhì)粒 DNA 有大量的 nick 或 gap（限制性內(nèi)切酶酶切雙鏈 DNA 不能發(fā)現(xiàn)某條單鏈 DNA 上是否有 nick 或 gap），則本方法的成功率將會(huì)降低。如果質(zhì)粒宿主菌 DNase 活性沒(méi)有去除干凈，從中純化的質(zhì)粒 DNA 將會(huì)有更多 nick。如果模板不是新鮮制備的質(zhì)粒 DNA，初步測(cè)試后效果不好，建議用自備的 E.coli DNA 連接酶對(duì) nick 進(jìn)行修復(fù)。操作請(qǐng)按E.coli DNA 連接酶使用手冊(cè)進(jìn)行。</p><p>二、一管式點(diǎn)突變 PCR（20 ?L 體系）</p><p>5.按下表設(shè)置兩個(gè) PCR 反應(yīng)：</p><p>成分樣本管陰性對(duì)照管模板 DNA2 ng-</p><p>染料法 2×超保真PCR MasterMix10 ?L10 ?L</p><p>自備引物一(10 ?M)1 ?L不加</p><p>自備引物二(10 ?M)不加1 ?L</p><p>補(bǔ)超純水到終體積20 ?L20 ?L</p><p>6.放入熒光定量PCR 儀中按下面參數(shù)進(jìn)行PCR：</p><p>步驟溫度時(shí)間循環(huán)數(shù)</p><p>變性98℃3 分鐘1 次</p><p></p><p>PCR98℃20 秒30 次，在</p><p>68℃時(shí)采集 SYBR</p><p>通道的熒</p><p>光信號(hào)</p><p>68℃30 秒</p><p>72℃30 秒/Kb（質(zhì)</p><p>粒 DNA 長(zhǎng)度）</p><p>注意：由于本產(chǎn)品是染料法實(shí)時(shí) PCR，故盡管設(shè)置的循環(huán)次數(shù)是 30 次，但具體循環(huán)次數(shù)取決于擴(kuò)增曲線。最佳循環(huán)數(shù)是樣本管的擴(kuò)增信號(hào)剛好進(jìn)入平臺(tái)區(qū)的循環(huán)次數(shù)，在進(jìn)入平臺(tái)區(qū)后，可在復(fù)性步驟手動(dòng)停止 PCR。</p><p>7.按熒光定量 PCR 儀廠家提供操作流程進(jìn)行溶解曲線分析。樣本的 Tm 應(yīng)該比對(duì)照高</p><p>（長(zhǎng)處更對(duì)照管如果有 Tm，也是引物二聚體的 Tm），如果兩者的 Tm 一樣，則可能是樣本擴(kuò)增失敗，需要電泳檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的長(zhǎng)度。</p><p>三、DpnI 酶消化和后續(xù)操作</p><p>8.在 PCR 反應(yīng)管中加入 1 ?L DpnI 限制性內(nèi)切酶，混勻后 37℃孵育 2 小時(shí)。</p><p>9.反應(yīng)液可以直接取 1-2 ?L 用于化學(xué)轉(zhuǎn)化和電轉(zhuǎn)化，或者放-20℃保存?zhèn)溆谩?/p><p>10.轉(zhuǎn)化后通常會(huì)得到 50 個(gè)-500 個(gè)菌落，95%是所需要的突變。而對(duì)照沒(méi)有菌落。</p><p>選擇我們的<strong><strong></strong><strong><strong></strong><strong><strong></strong><strong>一管式點(diǎn)突變?cè)噭┖?/strong></strong></strong></strong>，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！</p></div> </div> </div> </div> </div> <div id=

會(huì)員登錄

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

標(biāo)簽：
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用：

提示

您的留言已提交成功！我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

會(huì)員登錄

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

該信息已收藏！
標(biāo)簽：
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用：
波多野结衣福利视频| 新视觉亚洲三区二区一区理伦| 丁香社区五月在线视频久| 国产污污污在线观看视频| 国产乱理伦片在线观看夜| 成年女人永久看片视频 | 人妻人久久精品中文字幕| 黑人大吊性交啪啪啪| 九九视频免费在线观看| 极品一区二区三区av| 日韩有码一区二区三区在线观看| 精品一区二区三区女性色| 亚洲国产成人手机版| 精品日韩欧美精品日韩| 国产一区二区三区 韩国女主播| 中文字幕人妻一区二区三区久久| 精品国产Av无码久久久一区二区| 日韩亚洲AV无码一区二区不卡| 亚洲男性天堂一区二区三区| 欧美亚洲干妞内射| 熟女菊蕾老妇俱乐部视频| 日本高清不卡一区二区三区| 日韩精品一区二区天堂| 欧美一级特黄大片在线看| 日本美女阴户射尿| 美女日比视频播放| 国产青青操骚货在线观看| 多男用舌头伺候一女| 成人刺激性视频在线观看| 夜夜38亚洲综合网| 国产成人精品区在线观看| 日韩国产精品视频一区| 骚狐狸免费在线观看视频| 彩虹网免费视频在线观看| 九九热在线精品免费看| 男人操女人下面国产剧情| 女人被男人操到高潮视频| 欧亚洲嫩模精品一区三区| 亚洲欧美一区二区爽爽爽| 操大美女逼射精视频| 久久久久亚洲精品无码系列|