病毒基因組DNA RNA快速提取試劑盒 II

病毒基因組DNA/RNA快速提取試劑盒 II

目錄號(hào)：91212

v 試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性：

室溫儲(chǔ)存12個(gè)月不影響使用效果， 各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。

v 產(chǎn)品介紹：

采用特異性結(jié)合病毒DNA/RNA 的離心吸附柱和du特的緩沖液系統(tǒng)，病毒DNA/RNA提取試劑盒適合于從無(wú)細(xì)胞體液，包括血漿、血清、腹水、培養(yǎng)細(xì)胞上清液、腦脊髓液及尿液等中快速提取高純的病毒DNA/RNA。該產(chǎn)品可以滿足絕大多數(shù)的病毒RNA/DNA的同時(shí)提取要求， 如病毒RNA：HCV（丙肝病毒）,HIV（艾滋病毒）,和HTLV（人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒）； 病毒DNA：HBV（乙肝病毒）和CMV（巨細(xì)胞病毒）等等。病毒裂解后，DNA/RNA后在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過(guò)一系列快速的漂洗－離心的步驟，將鹽、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈的病毒DNA/RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。純化后的病毒核酸無(wú)雜質(zhì)和PCR抑制劑，可直接適用于PCR/RT-PCR分析。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

v 產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 不需要使用有毒的苯fen等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。

2. 節(jié)省時(shí)間，簡(jiǎn)捷，單個(gè)樣品操作一般可在20分鐘內(nèi)完成。

3. 多次柱漂洗確保高純度，提取的病毒DNA/RNA 純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，可適用于各種常規(guī)操作，包括PCR/RT-PCR、酶切、測(cè)序、Southern 雜交等。

v 操作步驟：（實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)先閱讀注意事項(xiàng)）

提示：第一次使用前請(qǐng)先在10ml漂洗液RW中加入40ml無(wú)水乙醇，充分混勻，加入后請(qǐng)及時(shí)在方框打鉤標(biāo)記已加入乙醇，以免多次加入!

1. 200μl血清等體液（需回復(fù)到室溫，不足可用0.9% NaCl或者PBS補(bǔ)足）轉(zhuǎn)入上述1.5ml離心管，加入400μl 裂解液VLB, 立刻渦旋振蕩充分混勻。

2. 室溫(15-25℃)放置10分鐘，每隔5分鐘，振蕩混勻一次。

3. 加入450μl無(wú)水乙醇，立刻渦旋振蕩充分混勻。

如果周圍環(huán)境高于25℃,乙醇需要冰上預(yù)冷后再加入。

4. 將上述混合物加入一個(gè)吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm離心30-60秒，倒掉收集管中的廢液。

如果總體積超過(guò)750μl，可分兩次將溶液加入同一個(gè)吸附柱RA中。

5. 加500μl去蛋白液RE，12,000rpm離心30秒，棄廢液。

6. 加入500μl漂洗液RW（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇!），12,000rpm 離心30秒，棄廢液，加入500μl漂洗液RW，重復(fù)一遍。

7. 將吸附柱RA放回空收集管中，13,000rpm離心2分鐘，盡量除去漂洗液， 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。

8. 取出吸附柱RA，放入一個(gè)RNase free的離心管中，在吸附膜的中間部位加30-50μl RNase free H₂0（事先在 65－70℃水浴中加熱效果更好），室溫放置1分鐘，12,000rpm 離心1分鐘。如果想得到較多量的DNA，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，12,000rpm離心1分鐘。

洗脫體積越大，洗脫效率越高。如果需要DNA/RNA濃度較高，可以適當(dāng)減少洗脫體積， 但是最小體積不應(yīng)少于20μl，體積過(guò)小降低洗脫效率，減少DNA/RNA產(chǎn)量。

9. DNA病毒可以存放在2-8℃，如果要長(zhǎng)時(shí)間存放，可以放置在-20℃。RNA病毒建議最好立刻使用，否則立刻短期放置在-70℃?zhèn)溆谩?/span>

病毒基因組DNA/RNA快速提取試劑盒 II