40314快捷型植物基因組DNA提取試劑he 核酸提取
【簡(jiǎn)單介紹】
品牌 | NobleRyder/諾博萊德 | 貨號(hào) | 40314 |
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規(guī)格 | 50次 / 100次 / 200次 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 適合從植物干粉或者新鮮植物材料中提取基因組 DNA。 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
快捷型植物基因組DNA提取試劑he 核酸提取
【詳細(xì)說(shuō)明】
快捷型植物基因組DNA提取試劑he(溶液型)
快捷型植物基因組DNA提取試劑he 核酸提取
目錄號(hào):40314
v 試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性:
試劑盒組成 | 保存 | 50次 (40314-50) | 100次 (40314-100) | 200次 (40314-200) |
緩沖液 AP1 | 室溫 | 25ml | 50ml | 100ml |
緩沖液 AP2 | 室溫 | 10ml | 20ml | 40ml |
DNA溶解液 | 室溫 | 10ml | 10ml | 20ml |
RNaseA(10mg/ml) | -20℃ | 250 μl | 500 μl | 1ml |
本試劑盒在室溫儲(chǔ)存 12 個(gè)月不影響使用效果。儲(chǔ)存事項(xiàng):
1. 緩沖液 AP1、AP2 低溫時(shí)可能出現(xiàn)析出和沉淀,可以在 37℃-65℃水浴幾分鐘幫助重新溶解,不要?jiǎng)×覔u晃,以免形成過量的泡沫?;謴?fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用。
2. 避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化,各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。
v 產(chǎn)品介紹:
本試劑盒采用du特的緩沖液系統(tǒng),特別適合從植物干粉或者新鮮植物材料中提取基因組 DNA。無(wú)需酚/氯仿抽提,使用安全方便,可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。對(duì)樣品的起始重量沒有限制,實(shí)驗(yàn)者可根據(jù)自己的需求靈活調(diào)整。提取的基因組 DNA 片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒回收的 DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern 雜交等實(shí)驗(yàn)。
v 產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 不需要使用有毒的苯fen、氯仿等試劑。
2. 快速,簡(jiǎn)捷,操作整個(gè)過程可在1個(gè)小時(shí)內(nèi)完成。
3. 結(jié)果穩(wěn)定,產(chǎn)量高(比離心柱型的產(chǎn)量高一倍以上),OD260/OD280典型的比值達(dá)1.7~1.9,長(zhǎng)度可達(dá)50Kb-150kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各種酶切反應(yīng)以及文庫(kù)構(gòu)建。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)
v 注意事項(xiàng):
1. 所有的離心步驟均在室溫完成,使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13,000 rpm的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī),如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。
2. 用戶需自備異丙醇、70%乙醇、液氮研缽、水浴箱。
3. 開始實(shí)驗(yàn)前將需要的水浴先預(yù)熱好備用。
4. 本試劑盒為溶液型,可以很容易的按照比例擴(kuò)大或者縮小每次處理的量,請(qǐng)聯(lián)系我們索取其它處理量的操作手冊(cè)。
v 操作步驟:(實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)先閱讀注意事項(xiàng))
1. 取適量植物組織(新鮮組織100mg或干重組織20mg)在研缽中加入液氮充分碾磨成細(xì)粉。
2. 轉(zhuǎn)移細(xì)粉到一個(gè)1.5ml離心管,不要解凍,加入400μl緩沖液AP1和 4μl RNase A(10 mg/ml),旋渦振蕩,充分混勻幫助裂解。
如果組織裂解困難,可根據(jù)需要加一個(gè)輕柔勻漿10秒的步驟幫助裂解。大多數(shù)情況下不需要離心去除未wan全裂解的組織,因?yàn)楹竺嬗幸粋€(gè)離心去除的步驟。
3. 65℃水浴10分鐘,在水浴過程中顛倒離心管2-3次,混合樣品。
4. 加入130μl緩沖液 AP2,充分混勻,冰上放置5分鐘,14,000rpm離心5分鐘,小心吸取上清到一個(gè)新的1.5ml離心管,注意不要吸到界面物質(zhì)。
5. 可選步驟:將上清液再次14,000rpm(~13,400×g)離心5分鐘,小心緩慢吸取上清到一個(gè)新的1.5ml離心管中,不要吸到沉淀。
此步驟目的為去除上清液中的沉淀雜質(zhì),使提取基因組DNA純度更高。
6. 加入0.7體積的室溫異丙醇(例如500μl的上清液加350μl異丙醇),顛倒30次混勻或者直到出現(xiàn)棉絮狀(絲狀)白色 DNA 沉淀。
7. 12,000rpm離心2分鐘,在管底可以見到白色的DNA沉淀塊,倒棄上清。
8. 加入1ml 70%乙醇,顛倒幾次漂洗DNA沉淀,12,000rpm離心1分鐘, 倒去上清(注意不要把DNA沉淀倒掉了),倒置后在吸水紙上輕敲幾下以控干殘留乙醇,還可以用槍頭小心吸掉管底沉淀周圍和管壁的殘留乙醇,空氣晾干沉淀幾分鐘。注意不要干燥過頭,否則DNA極其難溶;也不能殘留太多乙醇,否則乙醇可能抑制下游如酶切反應(yīng)。
9. 加入適量DNA溶解液重新水化溶解DNA沉淀,輕彈管壁混勻,可以放置在65℃溫育30-60分鐘(不要超過一小時(shí)),期間不時(shí)的輕彈管壁幫助重新水化 DNA。也可以在室溫或者 4℃放置過夜來(lái)重新水化 DNA。
10. DNA可以存放在 2-8℃,如果要長(zhǎng)時(shí)間存放,可以放置在-20℃。
快捷型植物基因組DNA提取試劑he 核酸提取
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