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Paraformaldehyde 多聚甲醛4%（含DEPC）

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

多聚甲醛（Paraformaldehyde），又稱聚縮醛，為甲醛（Formaldehyde）的聚合物。是一種殺菌劑、抗真菌劑。免疫實(shí)驗(yàn)中常作為一種固定劑用于細(xì)胞或組織樣品的固定。在該應(yīng)用中，發(fā)揮固定作用的是單體甲醛，因此，使用前需將多聚甲醛經(jīng)過(guò)加熱使之轉(zhuǎn)化為單體甲醛。

本品為4%的多聚甲醛，是一種蛋白交聯(lián)劑，對(duì)組織穿透性好，組織收縮小。且溶液較溫和，能很好保存組織的抗原性和細(xì)微結(jié)構(gòu)，適用于組織標(biāo)本和細(xì)胞涂片的固定，主要用于免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）、免疫組織化學(xué)（IHC）、免疫電鏡等實(shí)驗(yàn)。另外，本品使用經(jīng)DEPC處理的溶液體系（RNase-free）配置的4%多聚甲醛，除了可以做免疫組化實(shí)驗(yàn)外，還可以用于原位雜交實(shí)驗(yàn)。

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。4℃避光保存。有效期1年。

使用說(shuō)明

1.免疫組化

1）組織固定：室溫或4℃浸泡固定2-24 h，用緩沖液漂洗后即可樹(shù)脂包埋用于組織切片。

注：依據(jù)切片的厚度來(lái)決定固定時(shí)間，不要超過(guò)24 h。

2）切片固定：室溫或4℃固定10 min-2 h，視切片厚度而定，用緩沖液漂洗后即可用于染色。

3）細(xì)胞固定：室溫或4℃固定10-30 min，用緩沖液漂洗后即可用于染色。

2.原位雜交

注意：實(shí)驗(yàn)過(guò)程要保證操作不受環(huán)境RNase影響，可用我司的RNase remover（固相RNse酶清除劑，貨號(hào)：10609ES60）噴灑工作臺(tái)，雜交爐等準(zhǔn)備潔凈環(huán)境；實(shí)驗(yàn)操作中使用RNase-free的槍頭，離心管，蓋玻片，以及RNase-free的PBS或者SSC清洗液。

1）組織固定：4℃浸泡固定2-24 h（邊搖晃），用RNase-free緩沖液（如DEPC-treated PBS）漂洗后即可用石蠟包埋用于組織切片；或者固定好的組織浸泡在30%蔗糖（溶于RNase-free PBS）4℃過(guò)夜，搖晃，使其沉浸在液面之下，即可用OCT包埋劑包埋用于組織切片；

2）切片固定：

A、用預(yù)冷的4%PFA于室溫固定10 min-20 min，視切片厚度而定；

B、用RNase-free緩沖液（如DEPC-treated PBS）漂洗3次，每次5 min；

C、用蛋白酶K（1 μg/mL in 50 mM Tris pH 8, 5 mM EDTA）低速搖晃，室溫處理5-45 min；

D、用預(yù)冷的4%PFA于室溫固定5-10 min，視切片厚度而定，用RNase-free緩沖液（如DEPC-treated PBS）漂洗3次，每次5min；

E、在磁力攪拌器上準(zhǔn)備一水盤，加入300 mL DEPC處理水和3.5 mL三乙醇胺（緩慢加入）；

F、將固定后的切片放入上述水盤中，并在切片上方滴750 μL無(wú)水醋酸，邊攪拌邊孵育10 min。

G、用DEPC處理的PBS清洗3次，5 min/次；之后進(jìn)入后續(xù)的雜交實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)

1）甲醛有毒，請(qǐng)注意防護(hù)。

2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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